ＥＸＣＥＬ宏计算在大批量ＥＬＩＳＡ结果处理中的应用

自1971年engvall发表了酶联免疫吸附反应(enzyme linked immunosorbent assay，elisa)用于igg定量测定的文章以来，elisa逐渐成为科研院所进行免疫检测的重要手段。然而，当检测样品数量太多时，对大批量elisa结果进行数据处理是一项非常繁琐的工作。笔者曾经采集了免疫后小鼠约360个血清样品，进行7个指标的elisa检测，每次检测进行3次重复，所得数据近万个。在对所有数据进行统计分析的过程中，笔者总结出一套简便易行的方法，即利用 excel的宏命令，大大提高了数据处理的工作效率。

一、材料和方法

(一)材料

acer便携式电脑(celeron 1.6ghz， 256m， 60g)，window xp系统，ms office 2003软件，实验室elisa检验所得部分数据(附表)

　

附表：小鼠血清中特异性抗体含量(a2-a4；a5-a7；a8-a10；a11-a13分别表示四种不同血清样品的三孔重复，b-h组同a，h11-h13为blank值) (二)方法

1.建表

新建excel表格，以数据组关键词取名，表格中每一个表单(sheet)的第一行标明此表单数据来源。www.11665.COm将酶标仪测量出的数据输入相应的表单，以表一为例，这是酶标仪从costar 96孔酶标板测出的od值，每一列的第2-4行、5-7行、8-10行、11-13行分别表示同一样品三个重复孔的数据。

2.录制宏

(1)选中即将进行操作的模式表单，点击“工具”—“宏”—“录制新宏”，给新宏取名，设置快捷键，选择保存目录，自此，下面的每一步操作都将纪录到此新宏中。

(2)计算各样品重复孔的平均值和标准差：在a15处，点击工具栏“粘贴函数”(fx) 按钮，在函数分类选“average”，再输入数据范围“a2 ： a4”，即可得平均值。选中a15，移动光标到此格右下角。当光标形状变成黑色十字形时，向右拖动鼠标到h15处(此步仅拖动单元格公式)，放开鼠标，继续点击h15右下角的箭头，向下拉到h24处，删除多余行，只保留15、18、21、24行数据。此时在a20处，点击fx按钮，选择“stdev”，选择数据范围“a2 ： a4”，即可得标准差。以同样的方法通过拖动公式计算其他样品的标准差值。

(3)点击“工具”——“宏”——“停止录制”，得到可以一步计算整板96孔数据平均值和标准差的新宏，命名为mouse，快捷键为ctrl+a。

3.运行宏

新建另一表单，输入欲进行处理的另一部分数据，注意格式与录制新宏的模板表单一致。输入完毕，按下快捷键ctrl+a，可瞬间得出此表单所有数据的平均值和标准差。

二、结果

一旦将所有数据按标准格式输入表格，利用宏命令进行计算将使劳动强度减小几十倍，近万个数据的标准差和平均值计算只需半个小时，大大提高了大批量elisa数据处理的效率。

三、讨论

宏是一系列命令和函数，存储于visual basic模块中。如果经常在excel中重复某项任务，可以用宏自动执行该任务。在excel中创建宏有两种方法：录制宏和使用vb编辑器。本研究只采用录制宏的方法，将即将进行的操作记录下来，然后运行宏，将已经录制好的这一系列操作在另一个表格或表单中进行重现。elisa结果格式多变，必须尽量将各表单数据整理为整齐的格式， 也可以另外的格式重新录制新宏。受此启发，使用vb编辑器进行宏编辑可以更加随意地在excel中嵌入任意需要的宏，为科研工作带来更大的便利。

参考文献：

[1]engvall e ， perlmann p.enzyme-linked immunosorbent assay (elisa)： quantitative assay of immunoglobulin g [j].immunochem， 1971， 8(9)： 871-874.

[2]kai-yuan wu， wu m， fu ml， et al. a novel chitosan cpg nanoparticle regulates cellular and humoral immunity of mice [j].biomed environ sci， 2006， 19(2)：87-95.

[3]gini courter annette， marquis karla browning著. 王军等译. office xp从入门到精通(中文版) [m].北京：电子工业出版社， 2001.9.