溴酚蓝

溴酚蓝，分子式：C19H10Br4O5S，浅黄色到棕黄色粉末；易溶于氢氧化钠溶液，溶于甲醇、乙醇和苯，微溶于水(约0.4g/100ml)，最大吸收波长422nm。一种pH指示剂，在pH3.0~4.6范围，颜色由黄变蓝。常用做电泳指示染料，凝胶中电泳迁移速度在小分子核酸或蛋白质区域。

1、性状描述

浅黄色到棕黄色粉末；易溶于氢氧化钠溶液，溶于甲醇、乙醇和苯，微溶于水（约0.4g/100ml）；最大吸收波长422nm

2、物理参数

熔点：273℃（dec.）（lit.）

3、分子结构数据

1、摩尔折射率：123.26

2、摩尔体积（cm3/mol）：304.5

3、等张比容（90.2K）：893.7

4、表面张力（dyne/cm）：74.1

5、极化率（10-24cm3）：48.86

4、计算化学数据

1.疏水参数计算参考值（XlogP）：无

2.氢键供体数量：2

3.氢键受体数量：5

4.可旋转化学键数量：2

5.互变异构体数量：3

6.拓扑分子极性表面积92.2

7.重原子数量：29

8.表面电荷：0

9.复杂度：662

10.同位素原子数量：0

11.确定原子立构中心数量：0

12.不确定原子立构中心数量：0

13.确定化学键立构中心数量：0

14.不确定化学键立构中心数量：0

15.共价键单元数量：1

5、贮存方法

1.储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。

2.应与氧化剂等分开存放，切忌混储。

3.配备相应品种和数量的消防器材。

4.储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

6、合成方法

1.将苯酚红溶于冰乙酸，搅拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液，搅拌几分钟后倾入60℃热水中，冷却至室温，放置过夜。过滤，依次用冰乙酸、苯洗涤滤饼，晾干，得溴酚蓝。

2.将酚红溶于冰乙酸中，加热至沸，滴加溴溶于冰乙酸中的溶液，黄色固体析出时，过滤，用乙酸洗去游离溴，置于空气中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙酮与冰乙酸混合溶剂重结晶，得纯品溴酚蓝。

3.将酚红和溴分别溶于醋酸中，制成溶液。先将酚红醋酸溶液加热至沸，然后在搅拌下缓慢加入溴的醋酸溶液：当酚红反应完全且黄色晶体不再析出后，冷却，过滤。用少量醋酸洗去结晶中的游离溴后，用醋酸或丙酮醋酸进行重结晶，在空气中干燥得纯品溴酚蓝。

7、用途说明

配置溴酚蓝指示液。用途：变色范围：pH2.8-4.6（黄-蓝），酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。

8、配置方法

方法1：1%的溴酚蓝

将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中，转移入滴瓶中，贴标签备用。

方法2：0.05%的溴酚蓝

配westernblot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝，2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上，溴酚蓝在水中的溶解度不高，直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法：

0.05%的溴酚蓝配制方法：取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围pH2.8——4.6（黄→蓝绿）。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大，因为指示剂用量毕竟很少。

方法3：1%溴酚蓝

加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。