多领域专家带来MALDI-TOF MS技术分析应用新视角
11月30日,由北京科技仪器设备合作服务中心委托、首都科技条件平台北京大学研发实验服务基地承办的MALDI-TOF质谱技术培训交流会议正式开幕。军医研究所研究员杨松成、首都医科大学附属北京同仁医院黄和生物技术有限公司专家梁海勇分别带来了MALDI-TOF质谱技术不同应用方向的报告。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱是近年来发展起来的一种新型软电离质谱。该仪器主要由两部分组成:基质辅助激光解吸电离离子源和飞行时间质量分析仪。质谱具有高灵敏度、高准确度和高分辨率的特点,为生命科学等领域提供了强有力的分析和测试手段。
据了解,自发明以来,质谱已获得六项诺贝尔奖。在这次培训会议上,杨松成重点介绍了质谱在生物医学领域的应用:质谱联用仪主要进行该领域的细菌、代谢组学、寄生虫和食品分析。早在1975年,质谱就已经被用于鉴定细菌。1996年,利用飞行时间质谱获得了所有细菌的指纹。通过分析,人类发现细菌的指纹通常在20千道尔顿之间,并且核糖体蛋白丰度为干细胞重量的60-70%。与传统分析方法相比,飞行时间质谱分析方法具有快速、可靠、重复性好等优点。因此,MALDI可用作微生物鉴定的有力工具,如细菌。
随后,黄带来了一篇题为《飞行时间质谱在临床微生物鉴定中的应用》的报告。“微生物鉴定有许多方法。传统的方法和分子技术存在一些问题,如相似菌株鉴定困难、对人员要求高、操作复杂等。,这限制了后续的识别效果并影响后续的临床用药。MALDI的使用具有操作简单、高通量、同时鉴定和同源性分析的优点。”根据实际应用情况,黄介绍了MALDI可用于菌种鉴定、耐药性分析和同源性鉴定。例如,MALD可用于鉴定缓解链球菌和肺炎链球菌、生长不良的颗粒链球菌、产气荚膜梭菌、诺卡氏菌和ge型放线菌。同时,真菌也可以通过商业或自建数据库进行鉴定。除细菌鉴定外,MALDI还可用于药物敏感性实验鉴定,如碳青霉烯酶类药物耐药性检测或不动杆菌同源性分析。
最后,梁海勇向每个人介绍了MALDI-TOF用于SNP分型和DNA甲基化定量检测。在单核苷酸多态性检测中,MALDI-TOF具有检测准确度高、高通量、一个反应可检测30个位点、检测时间短等优点。在DNA甲基化的定量检测中,MALDI-TOF具有准确性高、检测片段覆盖范围长、可达400-600bp、成本低等优点。此外,MALDI-TOF还可用于临床检测,如耳聋基因检测、人乳头瘤病毒基因检测、个体化用药基因检测和疾病预警基因检测。
据悉,此次活动是北京科技装备合作服务中心委托首都科技条件平台北京大学研发实验服务基地组织的企业用户系列培训活动之一。该系列活动旨在帮助中小企业培养科研人员,提高科研人员大型贵重仪器的理论知识水平和实际操作技能,提高仪器企业的科技创新能力和核心竞争力,为企业培养科研实力和真正具有研发实验能力的人才。