反向聚合酶链反应

聚合酶链反应或多聚酶链反应（PolymeraseChainReaction，PCR），又称无细胞克隆技术(“freebacteria”cloningtechnique)，是一种对特定的DN******段在体外进行快速扩增的新方法。1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。该方法一改传统分子克隆技术的模式，不通过活细胞，操作简便，在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增107～108倍，大大提高了DNA的得率。已广泛应用到分子生物学研究的各个领域的模板序列甚至一个DNA分子扩增107～108倍，大大提高了DNA的得率。已广泛应用到分子生物学研究的各个领域。

1、定义

用于扩增已知序列的DNA旁侧未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上没有识别位点的限制内切酶，切出包含已知DNA、而两端带有未知序列的区段，将切出的DNA区段环化，然后再按已知的DNA序列设计一对引物进行扩增。