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建立分析致死基因在不同组织中功能新方法

科普小知识2022-10-30 10:19:11
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(记者黄鑫)中国科学院生物化学与细胞研究所李劲松研究组和中国科学院神经科学研究所翔宇研究组联合获得了一只Tet3基因敲除的健康嵌合小鼠,并对Tet3基因敲除后大脑皮质的发育以及皮质和海马神经元的突触传递进行了探索。相关研究结果最近发表在《细胞研究》杂志上。

Tet3是脱氧核糖核酸双加氧酶Tet蛋白家族的重要成员,参与脱氧核糖核酸的去甲基化。Tet3系统敲除小鼠可以发育至出生,但在出生后24小时内死亡。因此,不可能快速研究成年小鼠不同组织中Tet3的功能。

李劲松团队在mT/mG小鼠胚胎的1-细胞期(表达红色荧光)注射Cas9基因,在2-细胞期将Cre基因和Tet3基因注射到其中一个卵裂球中。Cre基因能使卵裂球变成绿色荧光,同时,Tet3基因也能使卵裂球的Tet3基因发生突变。将这些注射的胚胎移植到假孕小鼠体内,获得红、绿细胞分布均匀的嵌合小鼠,这些嵌合小鼠能够正常存活。基因型鉴定显示红细胞携带野生型Tet3基因,而绿色细胞携带突变型Tet3基因。对嵌合小鼠大脑皮层中不同类型细胞比例的分析表明,Tet3基因敲除不影响大脑皮层中主要细胞类型的发育和分化。进一步测试发现,Tet3基因敲除后,小鼠大脑皮层和海马锥体神经元的兴奋性和抑制性突触传递发生了显著变化,表现为兴奋性突触传递上调和抑制性突触传递下调,表明Tet3在不同脑区的神经回路发育中发挥重要作用。

《中国科学日报》(2017-05-03第4版综合)