连接酶链反应
科普小知识2021-07-26 15:27:32
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连接酶链反应(LigaseChainReaction,LCR)是继PCR后,新出现的一种更加完善的DNA体外扩增和检测技术。在检测点突变等方面具有独特的优点。
1、原理
该技术是利用DNA连接酶构建共价磷酸键,特异地连接双链DNA,经加热变性、退火和连接等步骤后,再多次反复循环,从而使目的DNA得以大量扩增。
2、用途
1、单碱基突变遗传病的检测该技术在识别点突变方面优于PCR,该技术首先用于单碱基突变遗传病的诊断;据报道已用LCR识别了镰状细胞贫血患者珠蛋白基因发生的A→T替换。
2、病原微生物的检测可用于李氏杆菌、结核杆菌、淋球菌及沙眼衣原体等病原微生物种及亚种的鉴别。
3、定向诱变LCR法能连接PCR扩增片段,进行多位点同时定向诱变,或随机设计,因而是一种有效的基因改建和构造方法。
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