用于基因治疗的病毒或有致癌风险

正如基因疗法似乎终于实现了它的承诺，一项研究引起了人们对病毒载体的长期关注——许多努力依赖于病毒载体将治疗基因引入患者体内。这种“载体”是腺相关病毒(AAV)的简化版本，它被认为是安全的，因为它很难将携带的人类DNA织入细胞染色体，而细胞染色体可能会激活致癌基因。

然而，一项10年前用AAV治疗的血友病狗的研究表明，该载体可以很容易地将其有效载荷插入控制细胞生长的基因附近的宿主DNA中。

国家人类基因组研究所的基因治疗研究员查尔斯·文迪(Charles Vendi)表示，费城一个研究小组在上个月的一次会议发言中提供的数据是“好消息也是坏消息”。通过滑入染色体而不是*漂浮，治疗性DNA可能有更持久的好处。在最近于奥兰多举行的美国血液协会(ASH)年会上，加拿大皇后大学的医学科学家大卫·利利卡普说，整合“已经发生，而且实际上可能对所需蛋白质的长期表达非常重要”。

这一发现也引发了关于AAV病毒载体是否会带来不可接受的癌症风险的争论。据礼来卡普称，“我们还不确定。”

在一些早期基因治疗测试中使用的另一种病毒载体在将其负载整合到染色体上后，已经在一些儿童中引起了癌症。AAV似乎是一个更安全的选择，因为由修饰病毒引入的基因通常在细胞核中形成一个*浮动的环，称为*体。

AAV载体促成了最近成功基因治疗的激增。其中包括美国食品和药物管理局去年批准的一种治疗脊髓性肌萎缩症的药物，脊髓性肌萎缩症是儿童神经系统的一种致命疾病，以及一种预计今年批准的治疗血友病合并乙型凝血障碍的药物。在血友病治疗中，AAV感染肝细胞，并将器官转化为生产凝血蛋白的工厂，而凝血蛋白是患者所依赖的。

然而，对AAV安全的怀疑已经酝酿了近20年。一项研究发现，给新生小鼠服用高剂量的AAV可以将其遗传物质整合到动物的DNA中，并导致肝癌。许多基因治疗师认为，在新生老鼠身上的发现与成人无关。但是新的警告来自更大更老的动物——患有血友病甲的成年狗，它缺乏一种叫做凝血因子ⅷ的凝血蛋白。

在9只这样的狗中，7只AAV载体成功地提供了因子ⅷ的基因替换拷贝，并恢复了分子的稳定生产。费城儿童医院的基因治疗研究员丹尼斯·萨巴蒂诺在ASH年会上报告说，然而，大约三年后，其中两只狗的血液分子水平进一步增加，在7到8年内达到了原来水平的四倍。

在完成实验并研究了6只狗的肝脏后，研究小组发现AAV将因子ⅷ或更常见的调控序列片段整合到狗肝细胞基因组的许多位点，有时是影响细胞生长的基因。其中一些细胞比其他细胞分裂得更多，在一些动物中形成多细胞小泡或“克隆体”。

萨巴蒂诺的团队怀疑这些插入物激活了生长基因，并解释了克隆人和两只狗血液中第八因子水平升高的原因，尽管这还没有得到证实。

对一些研究人员来说，结果是令人鼓舞的:整合水平相对较低，狗的肝脏看起来很健康，它们的第八因子水平保持稳定。圣裘德儿童研究医院的安德鲁·大卫多夫说，“我不认为这太令人惊讶。”该医院赞助了第一次成功的血友病B患者基因治疗试验，该试验使用了AAV载体。

事实上，AAV治疗性DNA的整合可以解释为什么在这个试验中患者的凝血蛋白水平在9年后看起来是稳定的。相反，随着细胞分裂，*体携带的DNA可能会随着时间的推移而丢失，因为只有一个子细胞会继承替换基因。

然而，基因治疗领域的其他人担心这个克隆获得另一个促进生长的突变并成为肿瘤只是时间问题。“如果狗再活五年呢？”文迪提问道。一些研究人员表示，这种风险不仅可能发生在肝脏，也可能发生在接受AAV治疗的其他组织，如神经元和肌肉细胞。

萨巴蒂诺的数据为其他长期犬类研究提供了新的紧迫性，这些研究整合了携带基因的AAV，并计划对圣裘德血友病患者进行肝脏活检。Lillicrap说，他正在自己的9只狗小组中研究这个问题。与此同时，研究人员强调，接受AAV基因治疗的人应该在食品和药物管理局要求的5年随访期内监测肝癌的症状。该机构的发言人只说他“知道”萨巴蒂诺的发现。