末端脱氧核苷酸转移酶

末端转移酶（terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT）是一种无需模板的DNA聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。

中文名：末端脱氧核苷酸转移酶

外文名：terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT

性质：一种无需模板的DNA聚合酶

分子量：60000

1、简介

【浓度】20u/ul

【性状】悬浮液，重组酶。末端转移酶（Terminaltransferase,TdT）是一种无需模板的DNA聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3‘羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是：先在载体上打开一单个位点，把它与末端转移酶和某一dNTP（如dATP）一起保温以使添尾，另一待插入的外源DN******段则用互补的用同法添dNTP（dTTP）用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DN******段彼此退火，使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受体菌所修复。随酶提供10×反应缓冲液和25mMCoCl2

【来源】一般自牛胸腺中分离。

【用途】生化研究。催化DNA的3’末端添加同聚物；DNA的3‘末端标记。

2、功能

“末端转移酶”催化的加上核苷酸至DNA分子的3’末端。不像大多数的DNA聚合酶，它不需要一个模板。这种酶的优选底物是3‘突出端，但它也可以添加“核苷酸”（nucleotifes）至“钝末端”（bluntend）或“凹陷的3’末端”（recessed3'end）。钴是一种必要的辅因子，但是在酶催化后反应在的镁（Mg）和锰（Mn）施用“体外”（invitro）。

3、使用

末端转移酶在分子生物学中的应用。它可以被用来在cDNA末端的快速扩增（RACE）中来添加“核苷酸”（nucleotide），然后可以用来作为在后续PCR的“引物”（primer）的模板。它也可以用于添加标记放射性同位素的核苷酸，例如在TUNEL检测（末端脱氧核苷酸转移酶“dUTP缺口末端标记”（dUTPNickEndLabeling）），用于细胞凋亡的示范（其中的标记，在某种程度上，通过片段化DNA来进行）。也可用于治疗“急性淋巴性白血病”诊断之“免疫荧光测定”（immuno-fluorescence）。

在免疫组织化学中，抗体TdT酶可用于显示未成熟的T细胞和B细胞以及多能的“造血（Haematopoiesis）干细胞”的存在，其具有抗原，而成熟的淋巴样细胞总是呈“TdT阴性”。而末端转移酶阳性的细胞中发现少量的健康淋巴结和扁桃体，急性淋巴细胞白血病的恶性细胞也呈“TdT阳性”，而抗体，因此可以被用来作为面板诊断及区别这种疾病的一部分，比如，“初发期的小细胞肿瘤”（smallcelltumoursofchildhood）。