明视野显微镜

明视场显微镜，是通过聚焦镜汇聚到样品上，因而形成一个锥形的明亮光束并通过样品进入物镜的显微镜。用于观察经染色或本身具备颜色的细胞、组织片等标本。

1、明视野显微镜

明视野显微镜（brightfieldmicroscope）是最通用的一种光学显微镜。利用光线照明，标本中各点依其光吸收的不同在明亮的背景中成像。它由物镜、目镜、聚光镜、光源、载物台和支架等部件组成。其中聚光镜用于调节显微镜的照明，物镜和目镜是放大微小物体成像的主要部件。由同轴的两个正透镜——物镜和目镜组成的显微镜称为复式显微镜。其成像原理如图所示。图中F1与F1‘分别为物镜的两个焦点，F2与F2’分别为目镜的两个焦点。物件AB置于F1的前方，经物镜后，形成一个倒立的实像A'B‘，A'B’所在面为中间像平面，在F2稍靠后一些。A'B‘经目镜后形成放大的虚像A“B”。A“B”对物件AB是倒立的，对中间像A'B’是正立的，A“B”再通过眼睛后在视网膜上成像。未经染色处理的生物标本，由于对光线的吸收很少，造成反差低的影像，不利于明视野显微镜观察。使用染料对生物标本染色后增加了反差，成为明视野显微镜的主要观察对象。

2、基本概念

在明视野显微镜中，最有代表性的就是生物显微镜，当然，除了明视野，生物显微镜还有暗视野。暗视野显微镜在实际应用中，比明视野显微镜要少得多，下面主要说说明视野显微镜在平时的应用中要了解的部件名称：

1.目镜与物镜区别。同学们在操作中要注意观察，要观察到目镜没有螺纹，物镜有螺纹。

2.目镜、物镜的长短与其放大倍数的关系。同学们在观察中要了解到目

镜短，放大倍数大，目镜长，放大倍数小；物镜短，放大倍数小，物镜长，放大倍数大。

3.同学们在观察过程中要感受载玻片移动方向与物象移动方向之间的关系。

掌握绘细胞结构简图

1.用笔的要求：必须用2H、3H铅笔。

2.掌握绘图的位置、标注结构名称的要求。

3.掌握细胞形态结构名称和放大倍数的书写规定等。

3、正确的用法和操作步骤

1.部分同学说：明视野显微镜的放大倍数等于目镜乘以物镜。正确的说法是：显微镜的放大倍数等于目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数的积。

2.部分同学常将纸张、头发、树叶，甚至手指直接放于显微镜下观察。更有甚者是将材料放在反光镜上进行观察。正确的做法是：必须将要观察的物*得薄而透明。

3.随意移动已经对光后的明视野显微镜，以致去看其他同学的显微镜视野中的物象时什么都看不到。擦拭光学镜头时习惯来回反复擦或用力过大，这样会使物镜、目镜的光轴受破坏，或物镜（目镜）表面的增透膜损伤，影响物象、目镜的清晰度。

正确的操作方法是：用擦镜纸轻轻向一个方向擦拭，或由中心向外旋转式轻轻擦拭。如果只是清除镜片上的灰尘，只需用吹风球吹去即可。

4.转换不同倍数的物镜时直接用手扳物镜镜头，这样就容易使物镜的光轴发生倾斜。因为物镜转换器是一个机械精密度要求高的重要部件，其转动板采用铜合金制成，性能稳定，但材料质地较软，螺纹受力很易破坏。经常用力扳动物镜，会造成光学系统的轴线倾斜，致使物镜参数的改变，从而，影响显微镜的质量，影响观察效果。正确的操作方法是：用手捏着显微镜物镜转换器的转动扳旋转。

5.观察临时装片时将显微镜倾斜观察。这样就造成水分流至载物台上，腐蚀、污染了载物台，此外要观察的材料（如动物细胞）可能随水流跑了。

6.观察物象时不习惯两眼睁开，用左眼观察，总是睁一只眼闭一只眼。不习惯用左眼观察，借助于右眼绘图。

7.忽视低倍物镜与高倍物镜、油镜视野的差别。对一定型号的明视野显微镜来说，其视野与放大率成反比关系，即显微镜放大率越高其视野越小。很多同学在使用显微镜时，常常向老师诉说：我在低倍镜下看得很清楚，一换上高倍镜就找不到目标了。其原因在于不熟悉视野原理，只在低倍镜下粗略找

到观察目标后就急于转换高倍镜，结果使需要观察的部位并不在高倍镜视野内，自然也就找不到目标。

8.忽视低倍镜与高倍镜、使用油镜入射光线的调节。不少同学在使用低倍镜时采光过强，使用高倍镜、油镜时又采光较弱。正确的做法是：低倍镜采光均匀成明亮的青白色，换高倍镜、油镜时扩大光栏，或换用凹面反光镜和上升聚光镜来加强入射光线。当然，最科学的方法是用变压器控制人工光源，调节入射光线的强度是最为合适的。

总之，明视野显微镜的使用看起来简单，但同学们真正做到规范操作，熟练运用并不容易。只有在老师的科学指导下，真正去亲身感受和体验，才能学有所获、学有所乐，进而培养创新精神和探究能力。

4、注意事项

如果在工作中需要使用明视野显微镜进行镜检时，首先需要检查所使用的显微镜是否处在明视野状态。最简单的验证方法就是看看装在载物台下面的是哪种聚光器（相差聚光器、微分干涉/相差聚光器只要放在“0”（空挡）挡处也都可以用明视野观察。在使用较高级的显微镜时，就算显微镜上安装的是明视野聚光器，但仍需要根据所选用物镜镜头的种类核实一下所用的聚光器是否与之匹配。如所用的是消色差镜头，那么使用阿贝聚光器（数值孔径大约为1.2）或消色差等光程聚光器（数值孔径最大为1.4）均可。但如果需要用复消色差物镜进行镜检时，就必须考虑选用数值孔径大的消色差等光程聚光器，否则将有可能无法发挥显微镜的最大分变率。

其次需要检查聚光器是否已满足柯勒照明的要求，在使用不具备柯勒照明条件的老式聚光器时也要考虑将聚光器调中。