李兰娟新论文：病毒已出现致病性突变

4月19日，中国工程院院士李兰娟团队发布了一篇关于预印平台medRxiv的未经同行评审的新论文。文章指出，新型冠状病毒已出现能有效影响致病性的突变，在药物和疫苗研发中有必要考虑这些突变。

论文的主要结论:

新冠状病毒株的变异和多样性可能被大大低估。

不同突变株的细胞病变效应和病毒载量可以相差270倍。

三核苷酸突变可以大大提高病毒的复制率和致病性。发现有这种突变的患者保持阳性核酸达45天。

研究人员已经分离出可以从粪便中复制的活病毒，这与以前的报道不同。

2020年1月22日至2020年2月4日，研究人员从浙江大学附属医院收治的11名新感染患者中分离出病毒。这些患者的年龄从4个月到71岁不等，其中10人有接触武汉的历史。

研究人员对来自患者的这11种病毒分离株进行了超深度测序，并将其与GISAID数据库中的1111个基因组序列进行了比较。从11名患者分离的病毒*发现33个突变，其中19个是首次发现的新突变。

研究人员写道:

虽然在这项研究中，我们只分析了从11名患者中分离的病毒，但我们仍然观察到丰富的变异多样性。

......这表明新冠状病毒株的真正多样性仍然被大大低估了。

在新的冠状病毒中有许多突变，并且相当多的适应性相关突变集中在病毒S蛋白和人类ACE2受体结合的界面。

那么关键的问题是:

这些突变对病毒的致病性有作用吗？

众所周知，新感染的冠状病毒的症状非常复杂，也与患者的年龄和身体状况有关。为了客观地评估这些突变对病毒致病性的影响，研究人员决定进行体外感染试验。

他们选择了一种叫做Vero-E6的细胞系，这种细胞系具有与人类细胞非常相似的ACE2受体。他们用来自所有11名患者的病毒感染Vero-E6细胞，定期收集细胞并检测细胞的病毒载量。

在最初的4小时，这些细胞的病毒载量保持稳定，然后病毒的复制很少发生。

8小时后，患者6、7、9、10和11的病毒载量显著增加。

24小时后，除2号和7号外，所有病毒载量均显著增加，而10号和11号的增加速度比其他品种快得多。

值得注意的是，在24小时内，复制能力最强的10号和复制能力最弱的2号之间的病毒载量相差近270倍。

那么，较高的病毒载量是否意味着它对细胞的杀伤力越大？

研究人员发现，病毒载量越高，细胞的病理效应和死亡率越高。

来自患者11的病毒中出现了意外的三核苷酸突变，并且该突变在随后的实验中是“强的”，极大地提高了病毒株的复制率和致病性。事实上，病人在令人吃惊的45天内对病毒检测呈阳性。这种三核苷酸突变的功能效应值得进一步研究。

最后，与最近的报告“没有从粪便中分离出活病毒”相反，本研究中的三种病毒分离物来自患者的粪便样本，这表明新的冠状病毒确实具有在粪便中复制的能力。

最后，研究人员呼吁开发新的冠状病毒药物和疫苗，尽快考虑这些累积突变的影响，以避免潜在的陷阱。

幸运的是，在撰写本文时，本文提到的所有11名患者都已康复出院。

https://doi.org/10.1101/2020.04.14.20060160